(Flow cytometry, FCM) යනු පැල්ලම් සහිත සෛල සලකුණු වල ප්‍රතිදීප්ත තීව්‍රතාවය මනින සෛල විශ්ලේෂකයකි. එය තනි සෛල විශ්ලේෂණය සහ වර්ග කිරීම මත පදනම්ව සංවර්ධනය කරන ලද අධි තාක්ෂණික තාක්ෂණයකි. එය සෛලවල ප්‍රමාණය, අභ්‍යන්තර ව්‍යුහය, DNA, RNA, ප්‍රෝටීන, ප්‍රතිදේහජනක සහ අනෙකුත් භෞතික හෝ රසායනික ගුණාංග ඉක්මනින් මැනීමට සහ වර්ගීකරණය කළ හැකි අතර, මෙම වර්ගීකරණ එකතුව මත පදනම් විය හැක.
ප්‍රවාහ සයිටෝමීටරය ප්රධාන වශයෙන් පහත කොටස් පහකින් සමන්විත වේ:
1 ප්‍රවාහ කුටීරය සහ ද්‍රව පද්ධතිය
2 ලේසර් ආලෝක ප්රභවය සහ කදම්භ හැඩගැන්වීමේ පද්ධතිය
3 දෘශ්‍ය පද්ධතිය
4 ඉලෙක්ට්‍රොනික, ගබඩා, සංදර්ශක සහ විශ්ලේෂණ පද්ධතිය
5 සෛල වර්ග කිරීමේ පද්ධතිය
ඒවා අතර, ලේසර් ආලෝක ප්‍රභවයේ ලේසර් උද්දීපනය සහ කදම්බ සෑදීමේ පද්ධතියේ ප්‍රවාහ සයිටෝමෙට්‍රිවල ප්‍රතිදීප්ත සංඥා ප්රධාන මිනුම වේ. උද්දීපන ආලෝකයේ තීව්‍රතාවය සහ නිරාවරණ කාලය ප්‍රතිදීප්ත සංඥාවේ තීව්‍රතාවයට සම්බන්ධ වේ. ලේසර් යනු තනි තරංග ආයාමයක්, ඉහළ තීව්‍රතාවයක් සහ ඉහළ ස්ථායී ආලෝකයක් සැපයිය හැකි සුසංයෝගී ආලෝක ප්‍රභවයකි. මෙම අවශ්‍යතා සපුරාලීම සඳහා කදිම උත්තේජක ආලෝක ප්‍රභවයකි.
ලේසර් ප්රභවය සහ ප්‍රවාහ කුටීරය අතර සිලින්ඩරාකාර කාච දෙකක් ඇත. මෙම කාච කුඩා හරස්කඩක් (22 μm × 66 μm) සහිත ඉලිප්සීය කදම්භයක් වෙත ලේසර් මූලාශ්‍රයෙන් විමෝචනය වන වෘත්තාකාර හරස්කඩක් සහිත ලේසර් කදම්භයක් නාභිගත කරයි. මෙම ඉලිප්සාකාර කදම්භයේ ඇති ලේසර් ශක්තිය සාමාන්‍ය ව්‍යාප්තියකට අනුව බෙදා හරින අතර, ලේසර් හඳුනාගැනීමේ ප්‍රදේශය හරහා ගමන් කරන සෛල සඳහා ස්ථාවර ආලෝක තීව්‍රතාව සහතික කරයි. අනෙක් අතට, දෘෂ්‍ය පද්ධතිය කාච, සිදුරු සහ ෆිල්ටර කිහිපයකින් සමන්විත වන අතර ඒවා දළ වශයෙන් කණ්ඩායම් දෙකකට බෙදිය හැකිය: ප්‍රවාහ කුටියේ ඉහළ සහ පහළ.
ප්‍රවාහ කුටිය ඉදිරිපිට දෘශ්‍ය පද්ධතිය කාචයකින් සහ සිදුරකින් සමන්විත වේ. කාචයේ සහ පින්හෝලයේ (සාමාන්‍යයෙන් කාච දෙකක් සහ සිදුරක්) ප්රධාන කාර්යය වන්නේ ලේසර් මූලාශ්‍රය මගින් විමෝචනය වන චක්‍ර හරස්කඩක් සහිත ලේසර් කදම්භ කුඩා හරස්කඩක් සහිත ඉලිප්සාකාර කදම්භයකට නාභිගත කිරීමයි. මෙය සාමාන්‍ය ව්‍යාප්තියකට අනුව ලේසර් ශක්තිය බෙදාහරින අතර, ලේසර් හඳුනාගැනීමේ ප්‍රදේශය පුරා ඇති සෛල සඳහා ස්ථාවර ආලෝකකරණ තීව්‍රතාව සහතික කිරීම සහ අයාලේ යන ආලෝකයෙන් සිදුවන බාධා අවම කරයි.
පෙරහන් ප්රධාන වර්ග තුනක් ඇත:
1: දිගු ගමන් පෙරහන (LPF) - නිශ්චිත අගයකට වඩා වැඩි තරංග ආයාමයක් සහිත ආලෝකයට පමණක් ගමන් කිරීමට ඉඩ සලසයි.
2: කෙටි ගමන් පෙරහන (SPF) - නිශ්චිත අගයකට වඩා අඩු තරංග ආයාමයක් සහිත ආලෝකයට පමණක් ගමන් කිරීමට ඉඩ සලසයි.
3: Bandpass ෆිල්ටරය (BPF) - නිශ්චිත තරංග ආයාම පරාසයක ආලෝකය පමණක් හරහා ගමන් කිරීමට ඉඩ සලසයි.
ෆිල්ටරවල විවිධ සංයෝජන මගින් විවිධ තරංග ආයාම වල ප්‍රතිදීප්ත සංඥා තනි පුද්ගල ප්‍රකාශ ගුණක නල (PMTs) වෙත යොමු කළ හැක. උදාහරණයක් ලෙස, PMT ඉදිරිපිට හරිත ප්‍රතිදීප්තතාව (FITC) හඳුනාගැනීම සඳහා පෙරහන් LPF550 සහ BPF525 වේ. PMT ඉදිරිපිට තැඹිලි-රතු ප්‍රතිදීප්තතාව (PE) හඳුනා ගැනීමට භාවිතා කරන පෙරහන් LPF600 සහ BPF575 වේ. PMT ඉදිරිපිට රතු ප්‍රතිදීප්තතාව (CY5) හඳුනාගැනීමේ පෙරහන් LPF650 සහ BPF675 වේ.
ප්‍රවාහ සයිටෝමෙට්‍රි ප්රධාන වශයෙන් සෛල වර්ගීකරණය සඳහා යොදා ගනී. පරිගණක තාක්‍ෂණයේ දියුණුව, ප්‍රතිශක්තිකරණ විද්‍යාවේ දියුණුව සහ මොනොක්ලෝනල් ප්‍රතිදේහ තාක්‍ෂණය සොයා ගැනීමත් සමඟ ජීව විද්‍යාව, වෛද්‍ය විද්‍යාව, ෆාමසිය සහ වෙනත් ක්ෂේත්‍රවල එහි යෙදීම් වඩ වඩාත් පුළුල් වෙමින් පවතී. මෙම යෙදුම් වලට සෛල ගතික විශ්ලේෂණය, සෛල ඇපොප්ටෝසිස්, සෛල ටයිප් කිරීම, පිළිකා රෝග විනිශ්චය, ඖෂධ කාර්යක්ෂමතාව විශ්ලේෂණය, ආදිය ඇතුළත් වේ.
පසු කාලය: සැප්-21-2023
